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顯微操作器(簡稱微操)是做什么用的?你知道顯微操作器有哪些種類嗎?該如何選擇?顯微操作用的針尖兒端如何處理?今天就為您一一講解。
什么是顯微操作?
顯微操作(micromanipulation)是指在光學(xué)顯微鏡或解剖鏡的可見視野內(nèi),操作者一邊觀察一邊使用微玻璃針、解剖刀、吸量管等器具,進(jìn)行手術(shù)、解剖、注射等實驗操作。由于早期用于微小生物體的結(jié)構(gòu)解剖,故又稱顯微手術(shù)。
顯微操作器的用途有哪些?
目前,以細(xì)胞內(nèi)微注射和微灌注技術(shù)為基礎(chǔ)的玻璃針頭(Glass Needle,精細(xì)的玻璃微量毛細(xì)移液管)的使用,已經(jīng)在越來越多的實驗生物學(xué)研究領(lǐng)域中成為一項非常普遍的操作方法,比如在體外受精、轉(zhuǎn)基因中等等。描述這些技術(shù)比較恰當(dāng)?shù)脑拺?yīng)當(dāng)稱其為——顯微操作,因為這些操作是通過單個的或多個的筒狀玻璃微量移液管、準(zhǔn)確的定位裝置(顯微操作器)以及微量注射器或微量灌注器來在單個的細(xì)胞上進(jìn)行的。
采用顯微操作已取得許多實驗成果,如分離出微生物或孢子或培養(yǎng)細(xì)胞,進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng);對生長點等施以顯微手術(shù),對其進(jìn)行功能的研究;插入微電極,進(jìn)行細(xì)胞·細(xì)胞間的電位差測量;將細(xì)胞核等細(xì)胞器進(jìn)行摘除或移入而進(jìn)行的生理學(xué)或遺傳學(xué)的實驗等??捎糜诩?xì)胞核移植、基因注入、胚胎切割等手術(shù),也可用于分離單個細(xì)胞。包括細(xì)胞器的移植;各種大分子物質(zhì)(包括DNA/片段或特定的基因、信使核糖核酸、蛋白質(zhì)、酶類、熒光抗體、染料等)向細(xì)胞、細(xì)胞核內(nèi)的顯微注射、異種精子向卵子內(nèi)的注射、哺乳動物胚泡的顯微注射;各種動物的卵子和胚胎、特別是體積極小的哺乳動物卵子和胚胎在體外培養(yǎng)條件下的顯微切割、胚胎細(xì)胞的交換、重組和聚集以及顯微輻射(即用微束紫外光或激光在顯微鏡下轟擊細(xì)胞內(nèi)的某一部分精細(xì)結(jié)構(gòu))等一系列技術(shù)。
這些技術(shù)的建立對于研究個體發(fā)生和細(xì)胞分化、核質(zhì)關(guān)系、細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和生物大分子的功能、細(xì)胞的誘變與雜交、基因表達(dá)與發(fā)育調(diào)節(jié)、外源遺傳物質(zhì)對細(xì)胞、原生質(zhì)體或生物體的作用等方面均有重要作用。
有些顯微操作技術(shù)如胚胎切割、嵌合體制作,顯微注射外源基因以獲得轉(zhuǎn)基因動物等已開始應(yīng)用到大家畜上;細(xì)胞核移植已用于經(jīng)濟(jì)魚類的克隆。
什么是顯微操作器(micromanipulator)?
顯微操作器(簡稱微操)或稱顯微操縱器一種用來在顯微鏡下對細(xì)胞進(jìn)行細(xì)微手術(shù)和注射的裝置,該裝置受機(jī)械或電子控制,通過人工操縱能正常運動,或把運動程序輸入微處理機(jī),將玻璃毛細(xì)管尖兒端、 電極或探針等安裝在微操上, 每次以µm或nm進(jìn)行移動。利用甚小的工具做抓、切、擠壓、注入、縮回等動作。
常用的顯微操作器有3種:手動顯微操作器、 手動/電動一體顯微操作器、以及電動顯微操作器
顯微操作器能夠用于體外受精、 膜片鉗實驗、 細(xì)胞外記錄、 顯微注射, 以及任何要求微小機(jī)械位移的場合
顯微操作的特點是直觀、定位準(zhǔn)確并可進(jìn)行穩(wěn)定的三維操作。它使各類手術(shù)操作的度量水平比在肉眼和徒手條件下的操作提高了成百至上千倍。顯微鏡的高分辨率加上顯微工具及其三維驅(qū)動裝置以及微量注射液壓裝置等的高精密度,使顯微操作可達(dá)到很高的準(zhǔn)確度。分為顯微鏡下操作和解剖鏡下操作兩類。
顯微鏡下操作的設(shè)備:包括配有倒相和長焦距物鏡的顯微鏡、顯微操作器、顯微工具制作器、微電極拉制儀(拉針儀)、磨針儀、煅針儀、拋光儀、顯微注射儀等。
微電極拉制儀(拉針儀)也有許多種,如垂直重力式電動拉針器、水平式拉針儀和電磁式拉針器等,先將玻璃毛細(xì)管加熱到其熔化的溫度,再將其拉制成所需的合適大小的直徑和錐形,微量移液管小頭的直徑(小至0.2微米)與顯微操作器的高精度相關(guān),它可以用于準(zhǔn)確的移液。顯微工具制作器是用來制備微針、微吸管、微刀、微鉤等顯微工具的,它由可調(diào)電熱絲和除去鏡臺的解剖鏡等組合而成,適于針尖的加工。
拋光儀 電極拉制成功后,其表面必須作優(yōu)化處理,如用熱拋光的方法使電極表面光滑,周圍均勻,以提高實驗過程中的封接成功率.
鍛針儀用于顯微注射,可以鍛制成各種各樣的毛細(xì)針,適用于不同的應(yīng)用。鍛針儀除了磨光表面外,還可以切斷、彎曲和形成倒鉤,適合鍛制成各種毛細(xì)針尖兒端
磨針儀(微電極研磨儀)使用特殊的電機(jī)來*小化研磨平面的不規(guī)則運動:確認(rèn)移液管與研磨平面之間的接觸使得能夠以更高的精度進(jìn)行研磨。此外,該型號在所有轉(zhuǎn)速下都能提供穩(wěn)定的性能 - 從低精度到高精度,再到高速磨削。易于操作的粗和細(xì)移動同軸操縱器配備用于微量移液管的垂直操作,這也使得能夠進(jìn)行非常準(zhǔn)確的研磨。量角器安裝在移液器支架固定部分上,使得易于設(shè)定所需的研磨角度
注射用電極的尖兒端要求越高,所需處理越復(fù)雜,需選用的配套設(shè)備越多,詳細(xì)選擇請致電友誠生物,銷售人員會根據(jù)您的需求為您推薦高性價比的設(shè)備組合。
解剖鏡下操作的設(shè)備:這里所用設(shè)備的精密度沒有顯微鏡下使用的高,可根據(jù)研究對象及研究目的自行設(shè)計。解剖鏡用顯微操作器適用于兩棲類和魚類等卵子的細(xì)胞核移植和核酸或基因的卵內(nèi)顯微注射等工作。
顯微操作用儀器應(yīng)根據(jù)具體的實驗材料和實驗?zāi)康募艾F(xiàn)有設(shè)備來選擇,并注意儀器間的配套。
有些在解剖鏡下的實驗操作不需要特殊的顯微操作裝置,可直接用雙手持顯微工具進(jìn)行。如手持玻璃針在解剖鏡下分離動物胚胎的卵裂球、分離胚胎組織及進(jìn)行組織塊移植等。